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紫外-可見分光光度計:從原理到應(yīng)用

波長范圍

紫外可見分光光度計,以其精確的光譜分析能力,在生物化學、醫(yī)學、材料科學等領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。其波長范圍通常包括從紫外線(UV)到紅外線(IR),這一寬廣的覆蓋范圍確保了它可以對不同種類的物質(zhì)進行有效的分析。

波長范圍:從紫外線到紅外線

紫外-可見區(qū)

紫外區(qū)主要涵蓋波長為200nm至400nm之間的區(qū)域,這個范圍內(nèi)的光波最易被大多數(shù)無機化合物吸收,因此成為紫外光譜法的主要研究對象。而可見光則覆蓋了波長為400nm至700nm之間的一段光線,廣泛應(yīng)用于各種生物學和臨床檢測中。

可見光與紫外光的應(yīng)用

紫外光譜法通過測量特定波長下的吸光強度來定性或定量地識別分子,常用于藥物成分、食品添加劑、有機污染物等的篩查。相比之下,可見光譜法主要用于測定蛋白質(zhì)、核酸以及一些金屬離子的存在狀態(tài),如銅、鐵等。

操作規(guī)程

紫外可見分光光度計的操作主要包括預(yù)熱儀器、調(diào)整波長位置、測定樣品吸光度等步驟。以下是詳細的實驗操作指南:

一、預(yù)熱儀器

打開電源開關(guān)后,等待約15分鐘讓儀器穩(wěn)定,然后檢查各個部件是否正常工作,如燈泡、比色皿、讀數(shù)窗口等。

二、調(diào)整波長位置

根據(jù)需要測定的物質(zhì)選擇合適的波長。如果使用的光源是非選擇性的,則需先調(diào)節(jié)波長旋鈕,直至顯示所需的波長數(shù)值。

三、測定樣品吸光度

將待測樣品裝入比色皿中,確保比色皿中的樣品充分接觸光源。讀取儀器上顯示的吸光度值,記錄下來作為數(shù)據(jù)。

注意:每次實驗前應(yīng)仔細閱讀相關(guān)手冊以確認所有參數(shù)設(shè)置正確且符合實驗要求。

區(qū)別與聯(lián)系

紫外分光光度計和可見分光光度計的區(qū)別在于它們所使用的光源不同。紫外分光光度計使用的是紫外光源,可以產(chǎn)生較短波長的光;而可見光分光光度計則使用可見光源,能夠發(fā)出較長波長的光。盡管兩者的工作原理不同,但它們都可以用來分析不同類型的分子,只是分辨率和靈敏度略有差異。

紫外可見分光光度計是一種多功能的儀器,適用于多種領(lǐng)域的分析需求。通過準確測量特定波長下物質(zhì)的吸光度變化,它能幫助科學家們理解并解釋物質(zhì)的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和反應(yīng)過程,從而推動科學研究和技術(shù)的發(fā)展。

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